Technique de chromatographie sur couche ...
Extrait de Radiopharmacologie pour technologues en médecine nucléaire, page 166
Figure 9.8 - Technique de chromatographie sur couche mince.
Matériel (a) :
Support : bande ITLC-SG; 7,5 X 1,2 cm activée
Solvant : butanone
Autre : éprouvettes, pinces et ciseaux, activimètre ou autre système de comptage, seringue et aiguille 25G, gants et absorbant
Procédure :
- Déposer approximativement 1 ml de solvant frais dans une éprouvette (15 ml); fermer hermétiquement pour permettre la saturation par les vapeurs de solvant.
- Préparer une bande chromatographique ITLC-SG activée (par chauffage à sec) en marquant l’origine du radiochromatogramme à 1 cm du bas de la bande avec un crayon de graphite. Marquer le front de solvant à environ 1 cm de l’extrémité supérieure de la bande à l’aide d’un crayon-feutre à encre non permanente (b). De cette façon, l’encre formera une traînée qui indiquera que le développement est terminé. Les bandes doivent être manipulées délicatement, sur un papier absorbant, avec des gants sans poudre pour éviter d’y déposer des traces de gras et des saletés.
- À l’aide de la seringue, déposer une goutte (diamètre < 5 mm) sur la ligne d’origine. Laisser sécher (c).
- À l’aide d’une pince, déposer délicatement la bande dans l’éprouvette en évitant les éclaboussures. S’assurer que la goutte ne vienne pas en contact avec le solvant et que seules les extrémités de la bande touchent à la paroi. Refermer l’éprouvette (d).
- Laisser migrer le solvant jusqu’à ce qu’il atteigne le repère supérieur (e).
- Retirer la bande à l’aide des pinces. Marquer le front de solvant au crayon de graphite.
- Couper la bande au centre, placer les deux portions dans des éprouvettes et compter dans l’activimètre ou un autre instrument de mesure de la radiation (prendre garde à la saturation du détecteur!) (f et g).
Auteur :
Luc Cloutier, Projet Bleu
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Ayant droit :
CCDMD
Catégorie : Pédagogie
Numéro : 55748
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