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Analyse moléculaire d'un gène


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Analyse moléculaire d'un gène

Extrait de Biologie moléculaire, page 251

Figure 15.1 – Analyse moléculaire du gène HFE pour la présence de la mutation C282Y par analyse des sites de restriction.

A) On extrait l’ADN d’un patient à partir d’un prélèvement sanguin.
B) Un fragment d’ADN contenant potentiellement la mutation C282Y est amplifié par PCR (réaction de polymérisation en chaîne) et digéré par l’enzyme de restriction RsaI. Le fragment d’ADN provenant de l’allèle normal demeure intact alors que le fragment d’ADN provenant de l’allèle mutant est clivé par l’enzyme.
C) La migration sur gel d’agarose des produits de digestion permet de statuer sur la présence de la mutation et de déduire le génotype du patient. Patient 1 : homozygote normal (C282C/C282C); patient 2 : homozygote mutant (C282Y/C282Y); patient 3 : hétérozygote (C282C/C282Y).



Date : 2006
Auteur : Joëlle Brodeur, Martin Toussaint,  Projetbleu
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Ayant droit : CCDMD
Catégorie : Pédagogie
Numéro : 55586

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